(浙江省肿瘤医院,浙江杭州　310022)

【关键词】　定位显色;培养基;应用评价

【中图分类号】R378　　　　【文献标识码】B

　　尿道感染为临床常见的感染性疾病之一,快速而准确的鉴定出病原菌并给予准确的药敏结果才能正确治疗。传统细菌培养法程序繁琐,常常不能及时鉴定出病原菌以致延误诊断。笔者用科玛嘉尿道定位培养基,取得了较好的结果。

1　材料与方法

1. 1　标本来源　浙江省肿瘤医院2004年6月~2005年7月门诊及住院患者经无菌操作留取的642份中段尿标本,立即送检。

1. 2　干粉培养基　科玛嘉尿道定位培养基,麦康凯琼脂,血琼脂。

1. 3　其他材料　VITEK-32微生物鉴定仪及GPI、GNI+鉴定卡为生物梅里埃产品,微量生化管为杭州天和微生物试剂有限公司产品。

1. 4　培养方法　收集的临床标本用定量接种环分别接种血平板、麦康凯平板和科玛嘉尿道定位培养基, 37℃培养24 h观察结果,记录菌落生长颜色并用生化微量管和(或)VITEK-32进行鉴定。

2　结果

642份临床标本中有287份培养阳性,并对这些阳性标本分别用传统方法和尿道菌定向培养法鉴定细菌,鉴定结果见

表1。

表1　287例尿液阳性标本分离鉴定和菌落颜色变化

 菌种                             传统鉴定      尿道定位显色       颜色

 大肠埃希菌                      165　　         165　　       粉红色

 肠球菌属                          32　             32　         蓝绿色,较浅

 肺炎克雷伯菌                    20　             20　         蓝绿色,较深,有粘性

 表皮葡萄球菌                    25　             25　         白色至淡黄色

 弗氏枸掾酸盐复合菌            6                 6               蓝色

 肠杆菌属                           8                 8               翠绿色

 变形杆菌属                          5                 5               褐色,有迁徒现象

 白色念珠菌                          8                 8               乳白色

 不动杆菌属                          4                 4               乳白色

 铜绿假单胞菌                       4                 4               咖啡色,有金属光泽

 金黄色葡萄球菌                   3                 3               金黄色,较小

 少动鞘氨醇单胞菌                3                 3               奶油色,半透明

 链球菌属                              2                 2               天蓝色

 嗜麦芽寡糖养单胞菌             1                 1               奶油色,半透明

 粘质沙雷菌                        1                 1               墨绿色

 

3　讨论

通过科玛嘉尿道定位显色培养基与血平板的平行对照实验方法,对临床收集的中段尿标本进行分离培养和鉴定,结果显示2种培养基的检出率差异无显著性,其灵敏度和特异性基本一致。检测结果显示,引起尿道感染的主要致病菌为大肠埃希

菌(57.5%)、肠球菌属(11.2%)、表皮葡萄球菌(8.7%)、肺炎克雷伯菌(7.0%)等。由于大肠埃希菌在定位培养基上呈现出明显的粉红色,颜色特异,极易辨认,因此培养基允许用吲哚试验来鉴定大肠埃希菌;常见的肠球菌尤其是粪肠球菌在定位培养基上呈清晰、细小的蓝绿色,在定位培养基上呈现渗入性生长,一目了然,结合血平板上的菌落特征,可以作出尿道感染的快速诊断;铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌等细菌生长特有的色素或粘性在定位培养基上都能显现,仅需要进行几个目的生化试验即可明确结果,特别是变形杆菌,可以在尿道定位培养基上使用苯丙氨酸试验(Fed3)来鉴定;但对于不动杆菌属、沙雷菌属、凝固酶阴性葡萄球菌、肠杆菌属等少见感染菌的鉴定不是很理想,因为这些菌具有相似的菌落形态与显色,尚需要进一步的生化试验来确定。传统的鉴定方法常需要麦康凯和血平板进行互补,只能区别乳糖阳性和乳糖阴性,很难区分是否有混合感染。尿道定位显色不仅显示快速,对于占尿道感染菌的60%~70%的大肠埃希菌和肠球菌可以直接准确鉴定,减少培养后所需要的生化鉴定试剂及工作量。由于定位培养基上不同的细菌仅菌落本身呈现特定的颜色,菌落周围培养基并不着色,很容易从混合感染标本中辨认出2种或2种以上的目标菌,不易漏检,且显色的菌落不影响生化鉴定。鉴于定位培养基上菌落产生特定颜色的原理是在培养基中加入检测某些菌中特异性酶的底物,因而此培养基也可以用来鉴定其它感染区域例如创伤、烧伤以及胸腹水等部位不同的微生物。

总而言之,使用尿道定位培养基做尿道病原菌的分离和鉴定具有直观和易于鉴定的特点,可简化鉴定程序,大大提高实验室的检测效率,有助于泌尿道感染的快速诊断,值得推广应用。